Как проводится и что показывает иммуноферментный анализ?

Метод лабораторной диагностики - иммуноферментный анализ (ИФА) - основывается на реакции связывания между антигеном и антителом. Он позволяет выявлять различные белковые вещества как вирусной, так и бактериальной природы, а также ферменты и другие компоненты биологических жидкостей. Сегодня ИФА является неотъемлемой частью современной диагностики, которая не может обойтись без высокочувствительных лабораторных анализов. Ранее, для выявления причин различных симптомов, врачам приходилось ориентироваться на косвенные признаки болезни и проводить микроскопические исследования в поисках возбудителя инфекции. Однако в настоящее время диагноз может быть подтвержден или опровергнут благодаря лишь одному тесту - иммуноферментному анализу.

Суть иммуноферментного анализа состоит в реакции "антиген - антитело".

Антиген – это молекула, чужда организму, которая обычно является белком и может попасть в организм человека вместе с инфекционным агентом. Кроме того, чужеродные кровеносные частицы, несовместимые с группой крови человека, также могут быть антигенами.

Антигены могут вызывать иммунную реакцию в организме, направленную на защиту внутренней среды от посторонних веществ. В ответ человеческий организм синтезирует специальные вещества – антитела (иммуноглобулины), которые способны соединяться с антигенами по принципу "ключ в замок", образуя иммунные комплексы. Такие комплексы легче распознаются и уничтожаются клетками иммунитета. Именно на этой реакции основан принцип иммуноферментного анализа.

Обзор основных показателей

Один из способов определить наличие инфекционного процесса в организме - это анализ на наличие класса иммуноглобулинов. Существует несколько видов иммуноглобулинов, которые можно использовать для анализа заболевания: IgM, IgA и IgG.

Присутствие IgM свидетельствует о наличии острого инфекционного процесса в организме. Если IgM не выявлено, это может указывать на то, что в организме отсутствует конкретный возбудитель, либо же инфекция перешла в хроническую стадию.

Если результат теста на IgM отрицательный, а уровень IgA повышен, это обычно свидетельствует о реинфекции, хроническом или скрыто протекающем заболевании.

Если же обнаружены оба класса иммуноглобулинов - IgM и IgA, это может указывать на разгар острого периода заболевания.

Наличие IgG может говорить о хронизации заболевания, либо о том, что организм выработал иммунитет к инфекционному агенту и начал выздоравливать.

Выводы о состоянии здоровья человека следует делать на основе результатов всего комплекса анализов и сведений о состоянии здоровья в целом.

Варианты результатов ИФА

Иммуноферментный анализ (ИФА) представляет собой метод исследования, позволяющий выявить наличие антител или антигенов в образцах биологических жидкостей (крови, слюне и др.). Результаты исследования могут быть представлены в различных форматах, в зависимости от того, какое содержание было указано в бланке.

Один из вариантов – это таблица с перечислением всех антител или антигенов с пометками об отрицательной или положительной реакции. Также может быть указано количественное значение результата – отрицательный, слабоположительный, положительный или резко положительный. Данный вариант дает информацию о количестве антител в образце.

Еще один количественный показатель – индекс авидности антител, который выражается в процентах. Этот показатель указывает, сколько времени прошло с начала инфекционного процесса, чем выше значение индекса, тем больше антител в образце.

В наши дни существует тысячи видов тест-систем ИФА, позволяющих обнаруживать специфические антитела и антигены при самых разных патологиях. ИФА широко используется в медицине для диагностики заболеваний, назначения адекватной терапии и обеспечения эффективного лечения.

Различные типы антител: как они действуют и как их использовать

Антитела – это часть иммунной системы, которая борется с инфекциями. Существует несколько типов антител, каждое из которых предназначено для определенного этапа в борьбе с инфекцией.

Первыми антителами, которые вырабатываются в ответ на антиген (чужеродный белок), являются иммуноглобулины класса M (IgM). Обычно уровень IgM наиболее высок в течение первых дней инфекционного процесса.

Затем иммунная система производит иммуноглобулины класса G (IgG), которые помогают уничтожать антигены и укрепляют иммунитет организма против повторного инфицирования. Этому явлению приписывают большое значение при вакцинации, так как благодаря прививке в крови появляется достаточное количество IgG, которые могут быстро подавить инфекцию и предотвратить нанесение вреда здоровью.

Кроме того, существуют и антитела класса A (IgA), которые обнаруживаются в большом количестве в слизистых оболочках организма и задают «внутреннюю линию обороны», предотвращая заражение. Антитела класса E (IgE) используются в борьбе с паразитарными инфекциями.

В лабораторной диагностике обычно используются IgM, IgG и IgA. Их концентрация позволяет определить стадию инфекционного процесса, а также выявить, страдал ли человек определенным заболеванием, таким как краснуха или ветряная оспа.

Зачем нужен иммуноферментный анализ?

Если врач подозревает, что за заболевание отвечает конкретная инфекция или планирует проверить уровень определенного гормона, то ему необходимо назначить пациенту иммуноферментный анализ. Это исследование помогает выявить наличие антигенов и антител в организме человека.

В лабораторных условиях иммунная реакция «антиген - антитело» может быть воссоздана путем использования уже готовых антигенов или антител для определения наличия в соответствующем образце связующих соединений.

Для начала, в лаборатории необходимо получить образец биологической жидкости — обычно это сыворотка крови. Затем используются пластиковые планшеты с лунками, которые содержат очищенные антигены предполагаемого возбудителя (или антитела в случае, если ищут антиген). Образцы помещаются в лунки, где происходит процесс образования иммунных комплексов. Если связующее соединение образуется, особое красящее вещество вступает в ферментную реакцию, и результаты анализа оцениваются по оптической плотности при помощи инструментального метода.

ИФА имеет две формы — качественный и количественный. В первом случае можно получить однозначный ответ: найдено искомое вещество в образце, или нет. В случае количественного анализа, более сложная цепь реакций позволяет оценить концентрацию антител в крови пациента, что сравнивается с результатами предыдущих тестов и может помочь выявить стадию инфекционного процесса.

Интересная информация

Предшественником иммуноферментного анализа был радиоиммунный анализ, в котором были использованы меченые антитела и антигены для индикации успешной реакции. Однако, проведение такого анализа представляло потенциальный риск для здоровья сотрудников лаборатории, поэтому ученые начали искать безопасную альтернативу. Именно так в 1971 году был изобретен иммуноферментный анализ (ИФА).

Какие плюсы имеет иммуноферментный анализ?

Иммуноферментный анализ (ИФА) применяется в лабораторной диагностике и имеет несколько преимуществ, которые делают его более точным и эффективным для выявления заболеваний. Вот некоторые из них:

• Высокая чувствительность. ИФА позволяет обнаружить искомое вещество, даже если его концентрация в образце очень низкая.
• Высокая специфичность. Диагностика с помощью ИФА безошибочная - если результат положительный, значит, найдены именно те антитела или антигены, которые предполагались, а не другие.
• Раннее выявление заболевания. ИФА заменил бактериологический метод диагностики, который был достаточно затратным и сложным. Определение IgM с помощью ИФА позволяет точно диагностировать заболевание уже в первые дни его проявления.
• Минимальный процент ошибок. Использование иммуноферментного анализа минимизирует влияние человеческого фактора, что снижает вероятность ошибки. Результат анализа считается точным, так как большинство тестовых систем и реактивов для ИФА производятся в промышленных условиях.

Минусы данного метода

В ходе проведения иммуноферментного анализа (ИФА) необходимо знание, что конкретно искать, так как методика анализа подразумевает, что врач заранее имеет предположение о природе заболевания. Поэтому, для преднамеренного «угадывания» диагноза, нет необходимости назначать такой тест.

Для выявления возбудителя и определения его специфичных свойств при диагностики инфекционных заболеваний, ИФА неспособен. Этот метод лишь показывает наличие антител в крови пациента, непосредственно указывающих на наличие инородного микроорганизма в организме.

Несомненно, ИФА является высокоточным методом, однако он не является самым дешевым, поэтому для правильного его применения, необходимо подходить умным образом, а интерпретацией результатов должен заниматься квалифицированный врач.

Показания для проведения иммуноферментного анализа (ИФА) невозможно перечислить полностью, однако наиболее часто встречающиеся цели анализа следующие:

• Диагностика острых и хронических инфекционных заболеваний:
  • Поиск IgM и IgG антител к вирусным гепатитам A, B, C, D и E;
  • Определение IgG антител к ВИЧ;
  • Обнаружение IgM и IgG антител к цитомегаловирусу;
  • Выявление IgM и IgG антител к вирусу Эпштейна — Барр;
  • Поиск IgM и IgG антител к герпетическим инфекциям;
  • Обнаружение IgM и IgG антител к токсоплазмозу;
  • Определение IgM и IgG антител к кори, краснухе, сальмонеллезу, дизентерии, клещевому энцефалиту и другим заболеваниям;
  • Поиск IgG антител к паразитарным заболеваниям;
  • Обнаружение IgM и IgG антител к инфекциям, передающимся половым путем;
  • Определение IgG антител к хеликобактерной инфекции.
• Оценка наличия маркеров некоторых аутоиммунных заболеваний.
• Выявление онкологических маркеров, таких как простатспецифический антиген, раково-эмбриональный антиген и другие.
• Определение содержания гормонов в сыворотке крови, например, прогестерона, пролактина, тестостерона, тиреотропного гормона и других.

Анализ биоматериала и сбор образца

Сыворотка крови является основным биоматериалом для проведения ИФА. В лаборатории берут образец крови из вены у пациента и удалют форменные элементы, что может затруднить проведение анализа. Для некоторых других случаев может использоваться спинномозговая жидкость, околоплодные воды, мазки слизистых оболочек и т.д.

Чтобы избежать искажений результатов анализа, рекомендуется сдавать кровь на пустой желудок и отказаться от приема антибиотиков и противовирусных препаратов за две недели до исследования, если целью является диагностика хронических инфекционных заболеваний, которые протекают скрыто.

Как быстро получить результаты ИФА?

Для того чтобы получить результат анализа ИФА (иммунноферментного анализа) необходимые реактивы и хорошо организованная работа в лаборатории. Обычно результат может быть готов в течение одного или двух суток после взятия крови. Если требуется получить экстренный ответ, то в некоторых случаях время ожидания может быть сокращено до двух или трех часов.

Переписывая статью о расшифровке иммуноферментного анализа, стоит сохранять ее структуру без значительных изменений.

Иммуноферментный анализ (ИФА) - это диагностический метод, который используется для определения наличия или отсутствия определенного вещества в образце. В случае качественного ИФА результат будет однозначным: искомое вещество найдено или не найдено. Однако, если проводится количественный анализ, то концентрация может измеряться числовыми значениями или определенным количеством знаков «+» (от одного до нескольких).

Фото: freepik.com